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  赛智科技(杭州)有限公司  

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赛智科技推出鱼饲料中氨基酸的高效液相色谱(hplc)检测方案 
提 供 商: 赛智科技(杭州)有限公司
资料大小: 132K
发布时间: 2014-03-11
浏览次数: 881
资料介绍

随着我国饲料工业的发展,鱼粉的需要量逐年增加,鱼粉的质量问题越来越引起饲料行业、养殖业的重视。鱼粉是水产饲料的主要蛋白源,尤其含有动物生长所必需的氨基酸,由于鱼粉用量大,价格高,有些厂家掺杂使假、以次充好,使鱼粉质量参差不齐,这一行为业给鱼粉品质分析带来了一定困难。因此,有必要建立一个有效的手段对鱼粉中氨基酸进行定量分析

 

以下是赛智科技利用LC-10Tvp高效液相色谱仪对鱼粉进行的HPLC检测方案

 

    1、仪器与试剂

 

    1.1仪器、设备

    LC-10Tvp高效液相色谱仪

    Vertex 色谱柱AA250mm×4.6mm×5μm

    分析天平

    恒温箱,温度控制在110±1

    微量进样器,(20μL)一支

    漩涡混匀器

    氮吹仪

    针头过滤

    微孔滤膜:0.45µm

 

    盐酸溶液,6mol/L:将优级纯盐酸与水按1:1(V/V)混合。

    氨基酸标准工作溶液。

    乙腈,色谱纯。

    三水合醋酸钠,优级纯。

    冰醋酸。

    正己烷,色谱纯。

 

   2、供试品溶液和对照品溶液的制备

    对照品溶液的制备   取氨基酸混合工作标液500ul,用水稀释至5ml,即得。

  供试品溶液的制备   称取试样50-100mg(准确至0.1mg)于据塞试管中,加入6.0mol/l盐酸10ml,混匀,充分提取10min,盖紧盖子。将样品置于110℃恒温干燥箱中,水解22-24h。冷却后充分混匀,过滤。根据实验要求移取适量上清液,60℃下氮气吹干,备用。以下按照衍生方法包进行。

  方法包衍生方法:将恒温水浴锅预热至50±1℃,分别将A、B两种衍生试剂用稀释至原来浓度的1/5倍。精密量取上述对照品1ml,至于试管中,加入稀释后的A溶液0.5ml和稀释后的B溶液0.5ml,摇匀;在50±1℃的水浴中加热45分钟,取出,加入正己烷溶液1ml,振摇;并用孔径为0.45μm有机膜过滤,放置30min后,取澄清的下层液进行分析实验。供试品的衍生步骤与对照品相同。

 

    3、色谱条件
   色谱柱:AA  4. 6 mmx250 mm,粒度5 µm

    流动相:
    流动相A:0.1mol/L醋酸钠溶液(pH6.5):乙腈=93:7
    配置方法:准确称取三水合醋酸钠13.6g于1000ml水中,搅拌均匀,溶解,用冰醋酸或氢氧化钠溶液调节pH值至6.5; 准确量取配制好的三水合醋酸钠溶液465ml和乙腈35ml,混合均与,抽滤,过0.45μm滤膜。
    流动相B:水:乙腈=20:80。

    配制方法:准确量取水100ml和乙腈400ml,混合均匀,抽滤,过0.45μm滤膜。
    波长:254nm
   流速:1. 0 mL/min

  梯度设置:

 

4、测定法

  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul,注入液相色谱仪,测定,即得
 
5、谱图 
 
 
 
 
 

 


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