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赛智科技推出茶叶中茶氨酸的高效液相色谱检测方案
访问量:519 发表于 2014-04-11 16:51:32
 

    茶氨酸(L-Theanine)是茶叶中特有的游离氨基酸,茶氨酸是谷氨酸γ-乙基酰胺,有甜味。茶氨酸含量因茶的品种、部位而变动。茶氨酸在干茶中占重量的1%-2%。茶氨酸在化学构造上与脑内活性物质谷酰胺、谷氨酸相似,是茶叶中生津润甜的主要成份。茶氨酸含量约为新茶的1~2%左右,其含量随发酵过程减少。

  图为茶氨酸分子式

【茶氨酸的作用】

对中枢神经影响:茶氨酸可以明显促进脑中枢多巴胺(dopamine)释放 ,饮茶抗疲劳作用被认为在一定程度上来自这一效果

降压作用:茶氨酸对脑内中枢神经递质5-羟色胺分泌量具有调节作用

影响记忆:茶氨酸可以增强记忆能力,提高学习效率

健康食品:保健食品市场上多数是为成人防病或改善作用的品种。像茶氨酸这种既不具有催眠,又可以解消疲劳、降低血压和提高学习记忆能力的保健食品实为少见,引人注目。为此,茶氨酸曾在1998年德国召开的国际食品原料会上获得研究部门大奖。

    鉴于茶氨酸在市场上的应用日趋增长,赛智科技参照GB23193-2008,利用LC-10Tvp高效液相色谱仪给出了茶氨酸的HPLC检测方案。

1、仪器与试剂

  1.1仪器、设备
   LC-10Tvp高效液相色谱仪
   Vertex 色谱柱:250mm×4.6mm×5μm
   分析天平
   振摇恒温水浴
   离心机
   C18固相萃柱
   针头过滤器
   微孔滤膜:0.45µm

  1.2试剂
  茶氨酸标准品
  邻苯二甲醛(OPA)
  乙硫醇
  硼酸
  氢氧化钠
   甲醇(色谱纯)
   乙腈(色谱纯)

2、供试品溶液和对照品溶液的制备

    对照品溶液的制备   取茶氨酸储备液(1mg/ml)适量,用水稀释成所需浓度。

  供试品溶液的制备  

  1、样品前处理:茶叶样品经磨碎混匀后,准确称取0.5g(精确到0.001g),加水100ml,在80℃振摇恒温水浴中浸提45min,冷却后将浸提液离心,过滤,上清液混匀待用。

  2、净化:C18小柱活化:依次用5ml甲醇,5ml水加入到净化小柱中,将上述试液过固相萃取柱,在经过0.46um滤膜过滤到棕色试管中,待衍生用。

  3、衍生:准确吸取茶氨酸标准使用液(或样品液)0.5ml于棕色试管中,加入0.5mlOPA衍生试剂,反应2min后,立即取10ml上机分析。

3、色谱条件

色谱柱:C18, 4. 6 mmx250 mm,粒度5 µm
流动相:以20mmol/l乙酸铵溶液为流动相A,以20mmol/l乙酸铵溶液:甲醇:乙腈=1:2:2为流动相B,VA:VB=1:1
波长:338nm
流速:1. 0 mL/min
柱温:40℃

4、测定法

  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul,注入液相色谱仪,测定,即得

5、谱图


   
图为茶氨酸样品


   
图为茶氨酸加标曲线


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