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饲料添加剂维生素(VE)的测定高效液相色谱法(HPLC)
访问量:816 发表于 2013-04-12 16:53:21
 
        维生素VE是一组有生物活性的,化学结构近似的酚类化合物的总称。其中4种(α,β,γ,ξ)较为重要,而已α-生育酚分布最广,效价最高,最具代表性.α-生育酚外观为淡黄色粘稠状液。维生素E添加剂多由D-α-生育酚乙酸酯和DL-α-生育酚乙酸酯制成。 维生素E是一种很好的生物抗氧化剂,与硒协同作用能阻止细胞内,外不饱和脂肪酸和其他易氧化物的氧化,保护细胞膜的完整,维持细胞的正常功能.维生素VE与动物的繁殖机能密切相关,具有促进性腺发育,促成收孕和防止流产等作用。高剂量维生素VE能促进免疫球蛋白的合成,提高动物体对疾病的抵抗力,增强抗应激能力。
 
1. 试剂和溶液
1.1 标准溶液的制备
(1)维生素VE(DL-α-生育酚乙酸酯)对照品:DL-α-生育酚乙酸酯≥99.0%
(2)维生素VE(DL-α-生育酚乙酸酯)标准贮备液:称取维生素E(DL-α-生育酚乙酸酯)对照品100mg(准确至0.0001g),于100ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释到刻度,混匀,4℃保存,该贮备液浓度为1.0mg/ml。
(3)维生素VE(DL-α-生育酚乙酸酯)标准工作液:准确吸取 DL-α-生育酚乙酸酯标准贮备液1.0ml于10ml棕色容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,配置工作液的浓度为100ug/ml。
1.2试样溶液制备
 (1)维生素VE粉的制备
    称取维生素VE粉约0.2g(相当于维生素E 0.1g,精确至0.0002g,置250ml棕色容量瓶中,加入甲醇适量,置超声波水浴中超声30min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀,经0.45um的滤膜过滤,滤液作为试样溶液
 (2)饲料试样的制备
称取试样1g,精确至0.0001g,置于100ml的棕色容量瓶中,加入约80ml的甲醇,瓶塞不要拧紧,于60℃超声波水浴中超声提取30min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。如果试样中维生素E(DL-α-生育酚乙酸酯)的标示量低于10g/kg,则将溶液用0.45um的滤膜过滤,进样测定,否则需将溶液用甲醇进一步稀释,使维生素E(DL-α-生育酚乙酸酯)的进样浓度在10ug/ml ~120ug/ml之间。

2.色谱条件
(1)色谱柱:VERTEX  C18柱4.6*150mm*5um(2)流动相:甲醇:水=98:2
(3)流速:1.2ml/min
(4)检测波长:285nm
(5)进样量:20ul

3.仪器 

恒温水浴锅,超声波,高效液相色谱仪LC-10Tvp紫外检测器SPD-10Tvp
4.VE粉的谱图


 

关键词:检测饲料添加剂,检测饲料中维生素VE的方法,饲料中维生素VE的检测方法,检测维生素VE,维生素VE的液相色谱法


来自液相色谱网:www.usedlabx.com
 

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