《蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法》
资料类别：分析方法
资料来源：中华人民共和国农业行业标准
适用对象：蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测
资料简介：1范围 
本方法规定了蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测方法。 
本方法适用于叶菜、菜花和部分果菜、菜豆等蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的检测。 
2原理 
根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性原理，如果蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低，酶的活性就不被抑制，实验中加入的底物就能被酶水解，水解产物与加入的显色剂反应产生颜色或水解产物本身有颜色。如果蔬菜的提取液含有农药并残留量较高时，酶的活性被抑制，基质就不被水解，当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小。用分光光度计测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。 

3试剂 
本方法全部使用蒸馏水，试剂为分析纯。 
3.1专用酶（胆碱酯酶），每瓶用10ml缓冲液（3.4）溶解。（酶粉冷冻保存）用时溶解，溶解后分装成3~4个小瓶，暂时不用的酶保存在冰箱的冷冻层内，使用时解冻，解冻后的酶贮存在0~50C冰箱的冷藏层内，拿出冰箱使用时，装酶的容器内放一些冰块，以保障酶一直在低温状态下，解冻的酶一周内用完。如用后还需重新冷冻，反复解冻不要超过2次，否则会影响酶的活性。 

3.2底物（碘化乙酰硫代胆碱），用10ml缓冲液（3.4）溶解。（0~50C下保存）。 
3.3显色剂（二硫二硝基苯甲酸），用10ml缓冲液（3.4）溶解。（0~50C下保存）。 
3.4缓冲液（磷酸氢二钠+磷酸二氢钾，pH=8），用1000ml蒸馏水溶解。（室温保存） 
4 仪器与设备 
4.1分光光度计，RP-410型农药残毒快速检测仪 
4.2电子天平，感量0.1g, 
4.3恒温箱 
4.4微型样本振荡器 
4.5移液枪， 
4.6比色皿 
4.7玻璃器皿 
注：上述仪器设备的使用请参阅相应的使用说明书 
5检测 
5.1样品制备 
将蔬菜取可食部分。 
5.2提取步骤 
用RP-410型农药残毒快速检测仪。取小白菜、小油菜、大白菜、甘蓝、菠菜、白菜花等叶菜类各2克，番茄、黄瓜、扁豆等非叶菜类各4克，切碎，分别放入提取瓶中，加入20ml提取试剂，震荡1-2分钟，倒出上清液。静置3-5分钟，放入平底小试管中，加入50µl酶，3ml样本提取液，50 µl显色剂，在37。C-38。C下培养30分钟。 加入50 µl底物,倒入比色杯内，放入RP-410型农药残毒快速检测仪中进行分别测定。 

            6结果计算 
            AC—AS    式中：X—抑制率，% 
            X=AC——空白三分钟后与三分钟前吸光值之差。 
            AC   AS——样品三分钟后与三分钟前吸光值之差。