1.取下色谱柱，然后重新连接到色谱仪上，让液体/气体反方向流过色谱柱。
　　
　　2.用HPLC级水冲洗掉盐/缓冲液。以1毫升/分钟的速度把25毫升水泵入色谱柱。

　　3.用25毫升异丙醇冲洗色谱柱。

　　4.用25毫升二氯甲烷冲洗色谱柱。

　　5.用25毫升正己烷冲洗色谱柱。

　　6.再次用25毫升二氯甲烷冲洗色谱柱。

　　7.用25毫升异丙醇冲洗色谱柱。

　　8.按正确的流动方向，把色谱柱重新连接到色谱上。用不含缓冲液的流动相冲洗色谱柱，然后重新倒入缓冲液。

　　9.用25到50毫升流动相平衡色谱柱。

　　10.注入标准物或样品，检查性能是否恢复。